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高效液相色谱法测定芦荟食品中芦荟甙含量

来源：- 浏览：68 更新时间：2011年12月02日

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在中国，芦荟有若干个别名，如象胆、油葱、象鼻草、龙角、番蜡、龙舌草等，芦荟叶中有一种十分重要的成分芦荟甙又名坝巴苷(barbalion)，使芦荟具有润肠、通便的作用。目前芦荟食品快速上市，成为一种新型的保健食品。我国目前尚未建立相应的测定方法，本文探讨了高效液相色谱法测定芦荟甙的含量，试样处理简单，操作简易，RSD为0.4%；线性范围0.01～0.1mg/mL；r为0.9992；准确度添加回收率89.3%～104.3%。
1　材料与方法
1.1　原理　用甲醇+水(55+45)作为溶剂，提取试样中的芦荟甙，高效液相色谱仪紫外检测器293nm条件下检测。
1.2　试剂
　　流动相　甲醇(分析纯)+水=55+45混匀。
　　标准溶液的制备　精确称取芦荟甙标准品(中国药品生物制品检定所，化学对照品)10mg，加水溶解移入100mL容量瓶中定容至刻度。
1.3　试样处理　首先将粒状试样粉碎成粉末状，准确称取上述经处理后的试样1.00g于50mL容量瓶中，加水30mL溶解，经超声振提5min，加水补足至刻度，提取液略澄清后经离心分离(3000r/min,5min)，取上清液10mL通过BOND ELUTE C18试样净化富集柱，用20mL水将这个柱洗净后，用(甲醇+水=55+45)混合液10mL溶解，提供给高效液相色谱仪分析。
1.4　标准系列　分别吸取芦荟甙标准液5mL，10mL,25mL置于50mL容量瓶用水定容，即得到0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.05mg/mL的标准系列。
1.5　测定条件　仪器：日本岛津公司生产岛津LC-4A；柱：shim-pack CLC-ODS,150mm×6mm；柱温：室温(15℃～25℃)；流动相：甲醇+水=55+45；流速：1mL/min；检测器：UV293nm；进样量：10μL；以Rt定性，峰面积法定量。
2　结果与讨论
2.1　校正曲线与线性方程　芦荟甙溶液质量浓度在0.01～0.1mg/mL范围内，校正曲线线性关系良好，相关系数为0.9992，该线性方程为y=1.11x+1.24(y为峰面积，x为质量浓度)。
2.2　准确度　依本法取试样9份，每3份一组，分别加入0.44mg、0.22mg、0.11mg标准品，依法进行试样处理，做加标回收率，测定结果见表1
表1　HPLC法测定芦荟甙的准确度试验

本底	添加量	测定量	回收率％
0.325	0.44	0.749	96.3
0.325	0.44	0.767	100.3
0.325	0.44	0.780	103.4
0.434	0.22	0.630	89.3
0.434	0.22	0.640	92.3
0.434	0.22	0.620	101.5
0.488	0.11	0.603	104.3
0.488	0.11	0.603	104.3
0.488	0.11	0.593	95.5

　　添加量为0.44mg的3份试样，其回收率范围为96.3%～103.4%，平均回收率为100%，标准差0.036；n=3，添加量为0.22mg的3份试样其回收率范围为89.3%～101.5%；平均回收率为94.4%；标准差为0.045；n=3，添加量为0.11mg的3份试样其回收率范围为95.5%～104.3%，平均回收率为101.4%，标准差为0.05。
2.3　精密度　同一试样依法测定6次，测得值(峰面积)分别为238709、25562、259788、243387、248235、246876，平均值为248759，RSD=0.5%。
2.4　实测试样　采不同批号市售木立芦荟叶粉末粒状品，产地福建长乐，依法测定，结果见表2。
表2　HPLC法测定6份芦荟食品试样的结果

批号	芦荟甙含量
mg/粒	mg/g
971130	0.52	2.72
971208	0.55	2.87
971211	0.53	2.77
971216	0.53	2.81
971223	0.52	2.74
971229	0.51	2.69

　　试样中的其他杂质对芦荟甙的测定无影响。

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