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保健食品中免疫球蛋白IgG的测定

来源：- 浏览：403 更新时间：2011年12月02日

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1、方法原理
利用高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条件下接配基，pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。

2、试剂
2.1 pH6.5 0.05mol/L 磷酸盐缓冲液 A液
2.2 pH2.5 0.05mol/L 甘氨酸盐酸缓冲液 B液
2.3 IgG标准贮备液：称取IgG标准品（Sigma化学公司）0.0100g，用重蒸水溶解并定容至10.0mL，摇匀，此液含1.0mg/mL LgG。
2.4 IgG标准系列溶液：以IgG标准贮备液，用重蒸水稀释成含IgG 0.2mg/mL，0.4mg/mL，0.6mg/mL，0.8mg/mL，1.0mg/mL的标准系列。

3、仪器
HPLC仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。

4、测定
4.1 样品处理：称取0.1g样品，用A液稀释至25.0mL，摇匀，通过0.45 μm微孔滤膜后进样。
4.2 HPLC参数条件
色谱柱：Pharmacia HI-Trap Protein G柱
波长：280nm
移动相：A液
B液进行梯度洗脱，见下表。
表1 梯度洗脱表

time	flow ml/min	a%	b%	gradient
0.0	0.4	100		※
0.5	0.4	100		11
4.0	0.4	100		6
4.5	0.4	0	100	6
14.5	0.4	0	100	6
15.0	0.4	100	0	11
18.0	0.4	100	0	11

来源:医药网-虎网医药-药械-资讯网 ( 责任编辑:sundy )

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