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A1 鉴别试验
取人参皂甙残渣，用甲醇制成每1ml含25mg，为供试样品，另取人参标准药材，照供试样品溶液配置，制成对照溶液，照薄层层析法（《中华人民共和国药典》一部（95）版附录35页薄层层析法）试验，取试验溶液与对照溶液各10mg，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷：甲醇：醋酸乙酯：水（15：22：40：10）的冷藏下层液为展开剂，展开，晾干，喷以10%硫酸 — 乙醇液，110℃加热10min显色，样品溶液与对照品溶液应在相同位置显色相同的颜色斑点。
A2 含量测定
样品粉碎后，精密称取2克（准确0.01克）样品，加入乙醚40ml,水浴微温，回流1小时，过滤，弃去乙醚液，于残渣中精密加入70%乙醇50ml，称定重量（准确0.01克），室温放置1小时，置于水浴上回流1小时，放冷，称重（准确0.01克），补足70%乙醇量，过滤，精密量取滤液25ml于蒸发皿中，于水浴上蒸干后，残渣用25ml水溶解并移入分液漏斗中，用水饱和的正丁醇（20，20，10，10ml）提取4次，合并正丁醇提取液，用水洗涤4次，每次20ml，移入105干燥至恒重的玻璃皿，置于水浴上蒸干，在105干燥半小时，在置于P2O5干燥器中，减压干燥12小时，精密称定，计算，即得。
有关学者及相关资料所提供的检测方法主要是：
1、《天然药物化学》，姚新生主编，北京：人民卫生出版社，1994年，336页，总皂甙检测方法；
2、《中药化学实验技术与实验》，冀春如等编，郑州：河南科技出版社，1998年，366页，总皂甙检测方法。
比色法检测
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器：
Amberlite-XAD-2大孔树脂,美国Sigma化学公司；正丁醇、乙醇,分析纯;中性氧化铝,层析用,100～200目；人参二醇,购自中国药品生物制品检定所；香草醛溶液,称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至100ml；高氯酸、冰乙酸,分析纯；人参二醇标准溶液,精确称取人参二醇标准品0.010g,用甲醇溶解并定容至10.0ml,即每ml含人参二醇1.0mg；比色计,UV-201型,日本岛津公司生产;层析管,10ml注射器。
1.2 实验步骤
1.2.1试样处理
称取1.0g左右的试样,置于100ml容量瓶中,加少量水,超声30min,再用水定容至100ml,摇匀,放置15min,吸取上清液1.0ml进行柱层析。
1.2.2 柱层析
用10ml注射器作层析管,内装1gAmberlite-XAD-2大孔树脂,上层加1cm高的中性氧化铝。先用35ml85%乙醇洗柱,再用35ml水洗柱,弃去洗脱液,精确加入1.0ml已处理好的试样溶液,先用35ml水洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,再用35ml85%乙醇洗脱人参皂甙,收集洗脱液于蒸发皿中,于水浴挥干。以此作比色用。
1.2.3 显色
在上述已挥干的蒸发皿中加入0.2ml5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣都溶解,再加0.8ml高氯酸,混匀后移入5ml带塞刻度离心管中,50～60℃水浴10min,取出冰浴冷却后,准确加入冰乙酸5.0ml,摇匀后,以1cm比色管于560nm波长处与标准管一起进行比色测定。
1.2.4 校正曲线
吸取人参二醇标准溶液(1mg/ml)0、20、40、60、80、100μL(相当于人参二醇0、20、40、60、80、100μg)分别放入10ml带塞离心管中,放在水浴上挥干(低于60℃),或热风吹干(勿使过热),精确加入0.2ml5%香草醛冰乙酸溶液与试样同样显色比色。以人参二醇量与吸光值画校正曲线,进行回归处理。计算试样中人参皂甙量。
计算 x=A/2.5×V×100W/1000×1000
式中：
x－试样中人参总皂甙量,g/100g；
A－从标准曲线得到的被测液中人参二醇量,μg；
V－试样稀释体积,ml；
W－试样质量,g；
2.5-Rb组皂甙平均分子量与人参二醇分子量之比(为常数)。
结果
检测灵敏度与线性关系本法最低检出限度为10mg/100g试样人参皂甙。在人参二醇20～100μg之间成线性关系,相关系数为0.999。回归方程为y=120.03x+3.61从回归方程看,线性关系好(r=0.999)。
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