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绿藻精的测定方法（分光光度法）

来源：- 北京虎网浏览：123 更新时间：2011年12月01日

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本方法适用于绿藻素中绿藻精的测定。
本方法绿藻精的最低检出量为15μg。
1. 方法提要
样品中的绿藻精，经提取后的水溶液，在260nm紫外光下测定吸光度值，进行定量。
2. 仪器
（1）紫外分光光度计。
（2）离心机：2500r/min。
（3）高压灭菌锅。
3. 试剂
（1）绿藻精纯品。
（2）高压灭菌锅。
4. 测定步骤
（1）样品处理：精密称取粉末样品1.00g。置于100mL量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇动量瓶使藻体在水中均匀悬浮。用吸管吸取10mL置于250mL量瓶内，加蒸馏水至刻度，再摇动量瓶使藻体均匀悬浮。
用吸管吸取10mL置于10mL离心管中，在高压灭菌锅内加热至120℃，压力100kPa, 40min。取出离心管，在室温下冷却5min后，以流水冲凉至室温。离心管中的悬浮液若不足10mL，再以蒸馏水补足，置离心管于离心机中2500r/min离心30min。
（2）样品测定：取上清液以1cm比色皿测定波长为260nm之吸光度（A260）。
5. 结果计算
绿藻精含量（OD值）=

式中 m——绿藻精的含量（g）。
相对标准偏差为3.8%，平均回收率为96.4%。
6. 注释
（1）绿藻是生存于淡水中一种绿藻类chlorella科的单细胞植物。20世纪50年代就有学者从绿藻中萃取出一种“绿藻生长因子（chlorella Growth Factor 简称C. G. F.）”，又称“绿藻精”。它是由核苷酸-多肽及其他5种有机物质组成，具有增强人体细胞活性，延缓衰老，增强机体免疫力等功效。
（2）根据厂方提供的方法，按中国国家标准CNS 4597. N6106食用绿藻素检验方法进行实验。
称取绿藻精纯品配成0.1mg/mL溶液，采用752C型紫外分光光度计在波长200~340nm之间进行扫描。结果最大吸收波长为260nm。
标准系列在0.1~1.0mg/mL范围内吸光度与浓度呈良好的线性关系，回归方程y=0.0086+0.5843x, r=0.9986，样品吸光度值亦在本曲线范围之内，证实本方法同样适用于OD值测定计算其含量。

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